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Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测 L248 细胞脂质过氧化物检测

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Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测 L248 细胞脂质过氧化物检测

氧化应激与自由基

氧是合成激素和ATP等生物活性物质的一种重要的分子。获得利用氧的能力是生命进化的重要的驱动力。氧可以激活细胞中的各种酶，被激活的氧种类涉及细胞功能的运作。尽管氧本身是生命的一个基本元素，但在氧化应激中，诸如DNA和蛋白质等细胞中的分子有时会被活性氧 (Reactive oxygen species, ROS) 破坏。
抗氧化能力
活性氧
谷胱甘肽
DNA损伤
脂质过氧化物
铁离子
谷氨酰胺、谷氨酸
自由基
NO研究

品名货号用途

Liperfluo-细胞脂质过氧化物检测 L248 细胞脂质过氧化物检测
MitoPeDPP试剂 M466 线粒体内脂质过氧化物检测

细胞中的氧化应激是由代谢、电离辐射和与DNA直接相互作用的致癌化合物产生的ROS导致的。在代谢的过程中，小部分的氧由于一个电子的还原变成超氧阴离子，接着超氧阴离子被超氧化物岐化酶 (SOD) 转变成氧气和过氧化氢。过氧化氢由过氧化氢酶或谷胱甘肽过氧化物酶还原成水。然而如果过氧化氢并没有被这些酶完全还原，当它被铁(Fenton反应)氧化将产生反应性极强的羟自由基。羟自由基还可以由紫外线照射产生或直接电离辐射水产生。羟自由基可以与脂反应产生脂质过氧化物。然而并非所有ROS都是有害的。次氯酸盐离子是一种由中性粒细胞的髓过氧化物酶产生的过氧化氢衍生而来的ROS，它具有杀菌活性。NO也称为内皮来源的舒张因子，它是由NO合成酶产生的。不过NO和超氧阴离子反应可产生具有细胞毒性的过氧亚硝基阴离子。ROS和活性氮化合物在生物系统中具有许多不同的活性。相应地好氧生物会产生防止氧化应激的防御机制。最近在对防御机制以及氧化损伤与疾病或老化过程之间关系的研究中，氧化应激已成为许多研究的焦点。最终已发展出许多用于检测ROS相关或ROS来源的物质的方法，这些物质包括超氧阴离子、超氧化物岐化酶、谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶、谷胱甘肽过氧化物酶、DNA损伤、8-氧基鸟嘌呤、8-硝基鸟嘌呤和蛋白质羰基等。

ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red试剂盒货号：EX05 外泌体蛋白质染色-红色

发表于由
ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red
商品信息
储存条件：0-5度保存，防潮
运输条件：室温

特点：

 

● 特异性外泌体定位，细胞外不聚集

● 回收率高

● 多种颜色可供选择

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外泌体宣传资料
选择规格：
5samples
现货
多种荧光可选
外泌体的标记和纯化一步到位
试剂盒内含
概述
特点
实验例
常见问题Q&A

试剂盒内含

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概述

近年来研究发现，外泌体作为细胞外囊泡（Extracellular vesicle; EV）的一种，与癌症的恶化与转移密切相关， 外泌体相关的研究也逐渐成为了关注的热点。为了研究通过外泌体的细胞间通信，细胞摄入外泌体时的示踪技术非 常重要，然而目前广泛使用的磷脂双分子层的荧光染料存在明显的缺点（1. 染色后外泌体粒径增大。2. 荧光染料自身形成粒子，造成背景增高）。本产品是为了解决这些问题而开发的新型荧光染料，并且有 Green, Red, Deep Red 三种颜色，可满足多重染色在内的各种实验需求。

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特点

特点1：外泌体的标记和纯化一步到位 

 

ExoSparkler系列已经对外泌体标记的最佳条件进行摸索并做成了操作手册，试剂盒内包含纯化所需的过滤管，可以简单快捷的进行外泌体的标记和纯化。

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纯化方法(未反应染料的去除)的比较

ExoSparklar系列中用于除去未反应染料的过滤管，与以往使用的相同用途的凝胶过滤法相比，能够以更高的回收率纯化外泌体。

回收率
过滤管（本试剂盒） 50%
凝胶过滤法 10%
   ※本公司的实施例：通过NTA技术（纳米颗粒跟踪分析）比较提取前后的外泌体粒子数

关于使用过滤管进行纯化的有效性，常见问题是：标记后的纯化操作时，过滤膜上有颜色残留，能否确定未反应的染料彻底分离了？详见Q&A。

特点2：多种颜色选择 

 

ExoSparkler系列包括膜 (Mem Dye)和蛋白质 (Protein Dye)荧光染色试剂，各三种颜色 (Green, Red, Deep Red)。

■实验条件

超速离心法纯化的外泌体(蛋白质的量为10 μg)经过各试剂染色后，与HeLa细胞(1.25×104 cells)一起培养24 h，清洗后进行荧光观察。

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■观察条件

Green:

Ex： 488 nm / Em： 490-540 nm

Red:

Ex： 561 nm / Em： 570-640 nm

Deep Red:

Ex： 640 nm / Em： 640-760 nm

实验例

实验例：确认外泌体的局部存在

将用ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red(产品名称：EX06，Protein Dye-Deep Red)或ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red(产品名称：EX02，Mem Dye-Red)染色的外泌体添加到HeLa细胞中，通过与溶酶体染色试剂(绿色)共染确认了外泌体在细胞内的定位。结果证实，用蛋白质或膜染色的外泌体均位于溶酶体中。

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观察条件 

Protein Dye-Deep Red（紫）：Ex：640 nm / Em：640-760 nm

Mem Dye-Red（红色）：Ex：561 nm / Em：570-640 nm

溶酶体染色试剂（绿）：Ex：488 nm / Em：490-540 nm

 

实验条件

将用超速离心法提取的外泌体(蛋白质量为5 µg)用每个外泌体染色试剂盒染色，添加到HeLa细胞(0.75×104cells)中，孵育3.5小时后对溶酶体进行染色，观察洗涤后的荧光图像。

 

产品名称 容量 货号
外泌体膜荧光染色试剂盒
（绿色）ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green 5 samples EX01
（红色）ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red 5 samples EX02
（深红色）ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Deep Red 5 samples EX03
外泌体蛋白荧光染色试剂盒
（绿色）ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Green 5 samples EX04
（红色）ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Red 5 samples EX05
（深红色）ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red 5 samples EX06
*纯化的外泌体(超离心法)，蛋白质：1-10 µg/sample，粒子数：10-100×10^8个/sample

常见问题Q&A

Q1：纯化外泌体建议用什么方法？
A1：一般我们推荐使用超速离心法纯化外泌体。但是，免疫沉淀法和磁珠法纯化的外泌体也有过成功染色的实例。
目前，聚合物沉淀法纯化的外泌体由于有聚合物的残留会影响外泌体的染色，所以无法使用本试剂盒。
Q2：细胞摄取外泌体时使用的是哪种培养基？
A2：我们公司在做染色后外泌体进入细胞的实验时，使用过MEM（Minimum Essential Medium）和DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium）。目前我们公司一直采用的含血清培养基进行外泌体实验，暂时无法推荐无血清培养基。
Q3：染色后的外泌体可以长期保存吗？
A3：染色后的外泌体不建议长期保存。染色后的外泌体最好尽快进行后续实验。
Q4：标记后的纯化操作时，过滤膜上有颜色残留，能否确定未反应的染料彻底分离了？
A5:虽然在过滤膜上可以观察到颜色的残留，但是我们公司通过下面的实验验证了过滤膜上的回收产物里不含未反应的染料。
<实验条件>
超速离心法纯化的①含有外泌体（蛋白质含量10 µg）的缓冲液和②单纯缓冲液，分别按照试剂盒说明书记载的步骤进行染色操作。染色后的产物加入到HeLa细胞中（1.25×104 cells），4小时后进行荧光观察。
结果显示，单纯缓冲液染色后的回收产物加入到细胞后，没有观察到荧光，进而可证明回收产物中没有残留的染料。

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① Exosome + Buffer

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② Only Buffer

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Fluorescent images at 4 h incubation

Detection conditions

Green：Ex 488 nm / Em 490 – 540 nm

Red ：Ex 561 nm / Em 570 – 640 nm

Deep Red：Ex 640 nm / Em 640 – 760 nm

线粒体染色 线粒体损伤 线粒体自噬 线粒体氧化应激 线粒体呼吸

发表于由

线粒体

线粒体(mitochondrion) 是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的细胞器，是细胞中制造能量的结构，是细胞进行有氧呼吸的主要场所，线粒体拥有自身的遗传物质和遗传体系，但其基因组大小有限，是一种半自主细胞器。除了为细胞供能外，线粒体还参与诸如细胞分化、细胞信息传递和细胞凋亡等过程，并拥有调控细胞生长和细胞周期的能力。最近越老越多的研究发现线粒体在细胞中的作用远远不止”细胞能量站”。它们参与了各种细胞功能调控，与很多人类疾病存在着莫大的联系。包括细胞信号传导、代谢、自噬、衰老和肿瘤发生都与线粒体的质量和活性相关
线粒体染色
线粒体损伤
线粒体自噬
线粒体氧化应激
线粒体呼吸

品名货号用途

MitoBright IM Red for Immunostaining试剂 MT15 免疫荧光用线粒体荧光染料Red
MitoBright LT Green试剂 MT10 线粒体长效荧光染色（绿色）
MitoBright LT Red试剂 MT11 线粒体长效荧光染色（红色）
MitoBright LT Deep Red试剂 MT12 线粒体长效荧光染色（深红色）
线粒体膜电位检测试剂盒 MT13 线粒体膜电位检测
线粒体膜电位检测试剂盒—JC-1 MitoMP Detection Kit MT09 线粒体膜电位检测
Cellstain- MitoRed试剂 R237 线粒体ATP检测-红色
Mtphagy Dye试剂 MT02 线粒体自噬
线粒体自噬—Mitophagy Detection Kit MD01 线粒体自噬检测
mtSOX Deep Red – Mitochondrial Superoxide Detection MT14 线粒体超氧化物检测
铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen M489 线粒体内二价铁离子检测
Si-DMA for Mitochondrial Singlet Oxygen Imaging试剂 MT05 线粒体内单线态氧检测
MitoPeDPP试剂 M466 线粒体内脂质过氧化物检测
ADP/ATP比率检测试剂盒—ADP/ATP Ratio Assay Kit-Luminescence A552 检测细胞中ADP与ATP的比率
Oxygen Consumption Rate(OCR) Plate Assay Kit-氧消耗量检测试剂盒 E297 氧消耗量检测
Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒 CK18 ATP活性检测
Glutamine Assay Kit-WST试剂盒 G268 谷氨酰胺的定量检测
Glutamate Assay Kit-WST试剂盒 G269 谷氨酸的定量检测
NAD/NADH Assay Kit-WST试剂盒 N509 NAD/NADH检测试剂盒
NADP/NADPH Assay Kit-WST试剂盒 N510 NADP/NADPH检测
α-Ketoglutarate Assay Kit-Fluorometric K261 对细胞内的α-KG进行定量检测

线粒体功能研究

▶ 线粒体呼吸指标一览表

▶ 线粒体染色选择指南

▶ 线粒体自噬检测

▶ 线粒体膜电位选择指南

▶ 代谢相关检测

▶ 癌症关联检测

▶ 脂质过氧化物积累与细胞衰老、线粒体之间的联系

 

线粒体质量控制途径

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线粒体关联产品详情，可点击页面上表产品链接

其他关联产品

 

线粒体呼吸 OCR耗氧率检测       Oxygen Consumption Rate(OCR) Plate Assay Kit
外泌体提取                                 ExoIsolator Exosome Isolation Kit
外泌体膜标记检测                       ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Green/Red/Deep Red
溶酶体功能（pH）检测               Lysosomal Acidic pH Detection Kit

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线粒体简要通路图

 

同仁化学 线粒体简要通路图.pdf

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线粒体相关检测指标

线粒体自噬检测

线粒体自噬
试剂 Mtphagy Dye Keima-Red
原理 线粒体自噬染料是一种PH敏感的荧光探针，该染料聚集在线粒体中，并由溶酶体的酸性条件而发出荧光 这是一种基于PH感应比值的荧光蛋白。该蛋白在溶酶体中具有比较高的荧光比值（如550 nm/440 nm）。
固定细胞染色 – –
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定 – –
染色时间 >30 min –
Ex/Em 530/700 440,550/620
产品货号 MD01 , MT02 –

线粒体自噬Mitophagy试剂盒【MD01】无需蛋白质表达/转染。添加试剂即可轻松检测线粒体自噬。

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线粒体膜电位检测

Membrane potential

线粒体膜电位
试剂 JC-1 MT-1 TMRM,   TMRE
原理 JC-1是一种被广泛使用的小分子线粒体膜电位探针，依赖于线粒体膜电位在线粒体中聚集，染料伴随聚集过程，荧光从绿色   (530 nm) 变为红色 (590 nm)。当线粒体发生去极化，红/绿荧光强度比值降低。 由于膜电位，细胞渗透性荧光染料在完整的线粒体中积累。MT-1具有极强的光稳定性，比JC-1更灵敏，可以提供与TMRE相当的检测灵敏度。 该试剂是细胞渗透性荧光染料，由于膜电位在完整的线粒体中积累。探针扩散发生在膜电位降低的受损线粒体中。
固定细胞染色 – – –
活细胞染色 Yes Yes Yes
活细胞染色后固定 – Yes –
染色时间 10- 60 min 30 min 30- 60 min
Ex/Em Monomer:514/529

J-aggregation: 585/590

 530-560 / 570-640 550/575
产品货号 MT09 MT13 –

JC-1、TMRE和TMRM广泛用于监测线粒体膜电位。然而，这些染料具有局限性，例如光稳定性低和醛固定后的保留性差。这些限制导致实验再现性差。

MT-1 MitoMP检测试剂盒具有高光稳定性，即使在染色后用多聚甲醛固定的细胞中。这些特征使得MT-1试剂盒能够产生高度可重复的结果。

此外，该试剂盒中包含的成像缓冲液使背景荧光最小化，并在进行测定时保持细胞活力。

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线粒体金属离子检测

Iron ion (Fe2+)

亚铁离子

 Calcium ion (Ca2+)

钙离子
试剂 Mito-FerroGreen Rhod 2-AM
原理 该试剂是一种细胞通透性探针，其积累在线粒体中，并与线粒体中的亚铁离子发生特异性反应，发出绿色荧光。 该试剂是一种细胞通透性探针，该探针积聚在线粒体中，并与线粒体中的钙离子发生特异性反应，发出红色荧光。
固定细胞染色 – –
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定 – –
染色时间 30 min 30-60 min
Ex/Em 505/535 553/576
产品货号 M489 R002

线粒体荧光染色

Mitochondria staining

线粒体染色
试剂 MitoBright LT series MitoBright IM Red MitoTracker series
原理 细胞渗透性荧光染料，基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。 细胞渗透性荧光染料，由于膜电位而聚集在完整的线粒体中，并与蛋白质和其他生物分子共价结合。 细胞渗透性荧光染料，基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。
固定细胞染色 – – –
活细胞染色 Yes Yes Yes
活细胞染色后固定 – Yes –
染色时间 >10 min 30 min 15 -45 min
Ex/Em 493/508,547/563, 643/663 548/566 490/516~644/665
产品货号 MT10、MT11、MT12 MT15 –

在HeLa细胞中4天后，MitoBright LT仍被证实保留在线粒体中。

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二价铁离子检测探针—FerroOrange F374 细胞内二价铁离子检测

发表于由

铁死亡的发生

在细胞中有大量的脂质组成细胞膜，细胞膜上的脂质会以大量磷脂的形式存在，细胞内的脂质会分为单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸，在氧分子和铁离子的存在下，多不饱和脂肪酸的增加容易被氧化而产生脂质过氧化物，有更多的不饱和脂肪酸的情况下，会更容易扩散，引起细胞膜损伤，也就是我们说的铁死亡。但是正常的细胞是可以调控这种细胞膜损伤，也就是我们常说的GPX4通路等等抗氧化系统，所以细胞才能在氧化物质存在的情况下，仍然可以存活。

二价铁离子检测探针—FerroOrange F374 细胞内二价铁离子检测
Iron Assay Kit -Colorimetric-试剂盒 I291 组织总铁含量及二价铁含量检测
铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen M489 线粒体内二价铁离子检测
ROS Assay Kit -Photo-oxidation Resistant DCFH-DA- R253 耐光型活性氧检测
活性氧检测试剂盒（ROS Assay Kit） R252 活性氧检测
氧化型/还原型谷胱甘肽定量试剂盒-GSSG/GSH Quantification Kit II G263 氧化型/还原型谷胱甘肽定量
胱氨酸摄取能力检测试剂盒—Cystine Uptake Assay Kit UP05 胱氨酸摄取能力检测
Glutamine Assay Kit-WST试剂盒 G268 谷氨酰胺的定量检测
Glutamate Assay Kit-WST试剂盒 G269 谷氨酸的定量检测

线粒体

发表于由

线粒体

线粒体(mitochondrion) 是一种存在于大多数细胞中的由两层膜包被的细胞器，是细胞中制造能量的结构，是细胞进行有氧呼吸的主要场所，线粒体拥有自身的遗传物质和遗传体系，但其基因组大小有限，是一种半自主细胞器。除了为细胞供能外，线粒体还参与诸如细胞分化、细胞信息传递和细胞凋亡等过程，并拥有调控细胞生长和细胞周期的能力。最近越老越多的研究发现线粒体在细胞中的作用远远不止”细胞能量站”。它们参与了各种细胞功能调控，与很多人类疾病存在着莫大的联系。包括细胞信号传导、代谢、自噬、衰老和肿瘤发生都与线粒体的质量和活性相关
线粒体损伤
线粒体自噬
线粒体氧化应激
线粒体染色
品名 货号 用途
线粒体膜电位检测试剂盒 MT13 线粒体膜电位检测
线粒体膜电位检测试剂盒—JC-1 MitoMP Detection Kit MT09 线粒体膜电位检测
Cellstain- MitoRed试剂 R237 线粒体ATP检测-红色
Cellstain- Rh123试剂(罗丹明123） R233 线粒体ATP检测-绿色
品名 货号 用途
Mtphagy Dye试剂 MT02 线粒体自噬
线粒体自噬—Mitophagy Detection Kit MD01 线粒体自噬检测
品名 货号 用途
mtSOX Deep Red – Mitochondrial Superoxide Detection MT14 线粒体超氧化物检测
铁离子荧光探针—Mito-FerroGreen M489 线粒体内二价铁离子检测
Si-DMA for Mitochondrial Singlet Oxygen Imaging试剂 MT05 线粒体内单线态氧检测
MitoPeDPP试剂 M466 线粒体内脂质过氧化物检测
品名 货号 用途
MitoBright IM Red for Immunostaining试剂 MT15 免疫荧光用线粒体荧光染料Red
MitoBright LT Green试剂 MT10 线粒体长效荧光染色（绿色）
MitoBright LT Red试剂 MT11 线粒体长效荧光染色（红色）
MitoBright LT Deep Red试剂 MT12 线粒体长效荧光染色（深红色）

线粒体功能研究

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线粒体简要通路图海报下载

同仁化学 线粒体简要通路图.pdf

线粒体相关检测试剂

线粒体自噬检测

线粒体自噬
试剂 Mtphagy Dye Keima-Red
原理 线粒体自噬染料是一种PH敏感的荧光探针，该染料聚集在线粒体中，并由溶酶体的酸性条件而发出荧光 这是一种基于PH感应比值的荧光蛋白。该蛋白在溶酶体中具有比较高的荧光比值（如550 nm/440 nm）。
固定细胞染色 – –
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定 – –
染色时间 >30 min –
Ex/Em 530/700 440,550/620
产品货号 MD01 , MT02 –

线粒体膜电位检测

Membrane potential

线粒体膜电位
试剂 JC-1 TMRM,   TMRE
原理 JC-1是一种被广泛使用的小分子线粒体膜电位探针，依赖于线粒体膜电位在线粒体中聚集，染料伴随聚集过程，荧光从绿色   (530 nm) 变为红色 (590 nm)。当线粒体发生去极化，红/绿荧光强度比值降低。 该试剂是细胞渗透性荧光染料，由于膜电位在完整的线粒体中积累。探针扩散发生在膜电位降低的受损线粒体中。
固定细胞染色 – –
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定 – –
染色时间 10- 60 min 30- 60 min
Ex/Em Monomer:514/529 550/575
J-aggregation: 585/590
产品货号 MT09 –

线粒体金属离子检测

Iron ion (Fe2+)

亚铁离子

 Calcium ion (Ca2+)

钙离子
试剂 Mito-FerroGreen Rhod 2-AM
原理 该试剂是一种细胞通透性探针，其积累在线粒体中，并与线粒体中的亚铁离子发生特异性反应，发出绿色荧光。 该试剂是一种细胞通透性探针，该探针积聚在线粒体中，并与线粒体中的钙离子发生特异性反应，发出红色荧光。
固定细胞染色 – –
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定 – –
染色时间 30 min 30-60 min
Ex/Em 505/535 553/576
产品货号 M489 R002

线粒体荧光染色

Mitochondria staining

线粒体染色
试剂 MitoBright LT series MitoTracker series
原理 细胞渗透性荧光染料，基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。 细胞渗透性荧光染料，基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。
固定细胞染色 – –
活细胞染色 Yes Yes
活细胞染色后固定 – –
染色时间 >10 min 15 -45 min
Ex/Em 493/508,547/563, 643/663 490/516~644/665
产品货号 MT10、MT11、MT12 –
Mitochondria staining

线粒体染色
试剂 DsRed MitoRed Rh123
原理 一种红色荧光蛋白染料，通过转染试剂与完整的线粒体结合。 细胞渗透性荧光染料，基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。 细胞渗透性荧光染料，基于线粒体膜电位而在完整的线粒体中积累。
固定细胞染色 – – –
活细胞染色 Yes Yes Yes
活细胞染色后固定 – – –
染色时间 Expression in 8 -12 hrs. >15 min >15 min
Ex/Em 558/583 560/580 507/529
产品货号 – R237 R233

线粒体氧化应激

Lipophilic peroxide

脂质过氧化物

 Singlet oxygen

单线态氧

 Superoxide

超氧化物
试剂 MitoPeDPP Si-DMA MitoSOX
原理 MitoPeDPP是一种新型荧光染料，由于其具有三苯基膦结构，因此可以穿过细胞膜并在线粒体中聚集。聚集在线粒体内膜上的MitoPeDPP可以被脂质过氧化物氧化而释放出强荧光。 该试剂是一种细胞渗透性荧光探针，积聚在线粒体中，与线粒体中产生的单线态氧发生反应，发出红色荧光。 该试剂是一种细胞渗透荧光探针，积聚在线粒体中，与线粒体中产生的超氧化物反应，发出红色荧光。
固定细胞染色 – – –
活细胞染色 Yes Yes Yes
活细胞染色后固定 – – –
染色时间 > 15 min > 45 min > 10 min
Ex/Em 452/ 470 644/ 670 510/ 590
产品货号 M466 MT05 –

引用论文

① H. Tanaka, S. Takebayashi, A. Sakamoto, N. Saitoh, S. Hino and M. Nakao, “The SETD8/PR-Set7 Methyltransferase Functions as a Barrier to Prevent Senescence-Associated Metabolic Remodeling.”, Cell Reports, 2017, 18(9), 2148.
② L. Garcia-Prat, M. Martinez-Vicente and P. Munoz-Canoves, “Autophagy: a decisive process for stemness”, Oncotarget, 2016, 7(11), 12286.
③ M. Bitar, S. Abdel-Halim and F. Al-Mulla, “Caveolin-1/PTRF upregulation constitutes a mechanism for mediating p53-induced cellular senescence: implications for evidence-based therapy of delayed wound healing in diabetes”, Am J Physiol Endocrinol Metab., 2013, 305(8), E951.
④ C. Wiley, M. Velarde, P. Lecot, A. Gerencser, E. Verdin, J. Campisi, et. al., “Mitochondrial Dysfunction Induces Senescence with a Distinct Secretory Phenotype”, Cell Metab., 2016, 23(2), 303.
⑤ E. Liao, Y. Hsu, Q. Chuah, Y. Lee, J. Hu, T. Huang, P-M Yang & S-J Chiu, “Radiation induces senescence and a bystander effect through metabolic alterations.”, Cell Death Dis., 2014, 5, e1255.
⑥ K. Nishimura, T. Kumazawa, T. Kuroda, A. Murayama, J. Yanagisawa and K. Kimura, “Perturbation of Ribosome Biogenesis Drives Cells into Senescence through 5S RNP-Mediated p53 Activation”, Cell Rep. 2015, 10(8), 1310.
⑦ M. J. Son, Y. Kwon, T. Son and Y. S. Cho, “Restoration of Mitochondrial NAD+ Levels Delays Stem Cell Senescence and Facilitates Reprogramming of Aged Somatic Cells”, Stem Cells. 2016, 34(12), 2840.

Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒货号：C542

发表于由
Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒货号：C542
活死细胞双染试剂盒
Calcein-AM/PI Double Staining Kit
商品信息
储存条件：-20度保存
运输条件：室温

特点：

● 经典细胞活死双染荧光检测试剂盒

● EX488 nm同时检测活死细胞

选择规格：
500 tests
3000 tests
细胞染色
活动进行中
试剂盒内含
产品概述
荧光特性
染色例
操作步骤
注意事项
参考文献

活动进行中

订购满5000元，200元礼品等你拿

凑单关联产品TOP5

NO.1.    Cell Counting Kit-8     细胞增殖毒性检测   

NO.2.    Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit    细胞凋亡检测

NO.3.    FerroOrange    细胞亚铁离子检测

NO.4.    Liperfluo    细胞脂质过氧化物检测

NO.5.    ROS Assay Kit    活性氧检测

试剂盒内含

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产品概述

Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒内含两种染料：Calcein-AM和Propidium Iodide (PI)。这个试剂盒可在荧光显微镜下同时观察在同一个细胞培养皿中的活细胞和死细胞。Calcein-AM可透过细胞膜，通过活细胞内的酯酶作用脱去AM基团，产生的Calcein (钙黄绿素) 发出强绿色荧光，因此活细胞在荧光显微镜下可被检测到绿色荧光。另一方面PI可以通过受损的细胞膜进入到死细胞内并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光，因此死细胞会被检测到红色荧光。除了用荧光显微镜外，也有报道可以用流式细胞仪和荧光酶标仪来进行定量检测。

荧光特性

Calcein-AM : λex=490 nm , λem=515 nm

PI : λex=530 nm , λem=580 nm

染色例

                                                                           细胞染色实例

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（a）                                     （b）                                      （c）

a)  Calcein-AM染FTC细胞（活细胞单染）

b)  PI染HCT116细胞（死细胞单染）

c)  Calcein-AM、PI染MHD-1 细胞（活死细胞双染）

最佳浓度摸索

由于不同细胞种类、细胞浓度的染色条件不同，我们建议自行摸索一下Calcein-AM和PI的最适浓度。

Calcein-AM和PI的最佳浓度是根据不同的细胞种类而定，通过以下的操作，我们可以找到不同细胞染色试剂的最佳浓度：

1. 通过在0.1%皂苷或0.1-0.5%毛地黄皂苷中培养10 min或通过在70%乙醇中培养30 min制备死细胞。

2. 用0.1-10 μM PI溶液染死细胞，以便找到仅针对细胞核染色而不对细胞质染色的PI浓度。

3. 用0.1-10 μM Calcein-AM溶液染死细胞，以便找到不对细胞质染色的Calcein-AM浓度，再以此浓度的Calcein-AM对活细胞染色以检验活细胞是否被染色。

操作步骤

以HeLa细胞为例

制备1 mmol/l的Calcein-AM储存液

【500 次】

将200 μl DMSO加入到含200 μg Calcein-AM粉末的管中，用移液器吹打溶解。

【3000 次】

将1 ml DMSO加入到含1 mg Calcein-AM粉末的管中，用移液器吹打溶解。

※Calcein-AM储存液需要避光，在-20℃密封保存。

 

制备染色工作液

将Calcein-AM储存液和PI储存液恢复至室温后使用。

在5 ml的PBS（-）中加入10 μl Calcein-AM储存液和15 μl PI储存液，混匀制成工作液。此时Calcein-AM的浓度为2 μmol/l，而PI的浓度为4.5 μmol/l。

 

染色步骤

1、 用Trypsin-EDTA消化细胞。

2、 通过离心收集细胞（1,000 rpm，3 min）。

3、 去除上清液，加入PBS（-）制备细胞悬液（105 – 106 cells/ml为宜）。

4、 重复步骤2和步骤3数次以消除培养基中的酯酶活性。

5、 取100 μl 染色工作液与200 μl 细胞悬液混合，在37℃培养15 min。

6、 在490±10 nm激发波长下同时观察黄绿色荧光的活细胞和红色荧光的死细胞。另外用545 nm激发波长单独观察死细胞。

注意事项

1、 由于本试剂盒中的Calcein-AM Reagent 粉末和PI Stock Solution量很少，有可能会粘在盖子或管壁上，开封前请先涡旋以使其振落下来。

2、 由于Calcein-AM储存液对潮气敏感，请在使用后密闭Calcein-AM储存液的盖子。如果不能一次用完，建议分装保存，例如分装成10 μl/管，用封口膜封口，并用铝箔纸包裹，放在一个密闭性能好的塑料袋中，并放入一包干燥剂，在≤-20℃密封避光保存。

3、 配制好的染色工作液请在当天使用。

4、 PI有疑似致癌性，使用前应注意以下几点：

1） 使用时请带好手套，口罩，防护眼镜等，不要接触到或呼吸到。

2） 当PI不慎接触到皮肤时，请立刻用大量的水冲洗。

3） 处理方法

清洗容器的清洗液和废液请按照实验室的有毒有害物质的处理方法进行处理，或按照以下方法处理：

・用UV照射的方法进行分解

・用次氯酸钠氧化分解后，进行中和处理

参考文献

1. A novel photothermally controlled multifunctional scaffold for clinical treatment of osteosarcoma and tissue regeneration,

Materials Today, 2020, doi.org/10.1016/j.mattod.2019.12.005

2. Mitochondria-Targeted Artificial “Nano-RBCs” for Amplified Synergistic Cancer Phototherapy by a Single NIR Irradiation,

Advanced Science, 2018, 5, 1800049

3. 4D-Printed Biodegradable and Remotely Controllable Shape Memory Occlusion Devices,

Advanced Functional Materials, 2019, 29(51), 1906569

4. Magnetic Hyperthermia-Synergistic H2O2 Self-Sufficient Catalytic Suppression of Osteosarcoma with Enhanced Bone-Re

generation Bioactivity by 3D-Printing Composite, Advanced Functional Materials, 2019, 1907071

5. A Substitution-Dependent Light-Up Fluorescence Probe for Selectively Detecting Fe3+ Ions and Its Cell Imaging Application,

Advanced Functional Materials, 2018, 28(35), 1802833

6. An Extendable Star-Like Nanoplatform for Functional and Anatomical Imaging-Guided Photothermal Oncotherapy,

ACS Nano, 2019, 13(4), 4379-4391

7. Near-Infrared Light-Triggered Sulfur Dioxide Gas Therapy of Cancer, ACS Nano, 2019, 13(2), 2103-2113

8. Nanoenzyme-Augmented Cancer Sonodynamic Therapy by Catalytic Tumor Oxygenation,

ACS Nano, 2018, 12(4), 3780-3795

9. Terrylenediimide-Based Intrinsic Theranostic Nanomedicines with High Photothermal Conversion Efficiency for Photoacoustic

Imaging-Guided Cancer Therapy, ACS Nano, 2017, 11(4), 3797-3805

10. Two-Dimensional Graphene Augments Nanosonosensitized Sonocatalytic Tumor, ACS Nano, 2017, 11(9), 9467-9480

11. Multifunctional Bismuth Selenide Nanocomposites for Anti-Tumor Thermo-Chemotherapy and Imaging,

ACS Nano, 2016, 10(1), 984-97

12. Molecular Responses of Human Lung Epithelial Cells to the Toxicity of Copper Oxide Nanoparticles Inferred from Whole

Genome Expression Analysis, ACS Nano, 2011, 5(12), 9326–9338

13. Living functional hydrogels generated by bioorthogonal cross-linking reactions of azidemodified cells with alkyne-modified

polymers, Nature Communications, 2018, 9, 2195

14. A strongly adhesive hemostatic hydrogel for the repair of arterial and heart bleeds,

Nature Communications, 2019, 10(1), 2060

15. Magnetic-responsive and targeted cancer nanotheranostics by PA/MR bimodal imaging-guided photothermally triggered

immunotherapy, Biomaterials, 2019, 219, 119370

16. Oriented collagen fiber membranes formed through counter-rotating extrusion and their application in tendon regeneration,

Biomaterials, 2019, 207, 61-75

17. Triple-functional polyetheretherketone surface with enhanced bacteriostasis and anti-inflammatory and osseointegrative

properties for implant application, Biomaterials, 2019, 212, 98-114

18. Ultrasmall Cu2-xS nanodots as photothermal-enhanced Fenton nanocatalysts for synergistic tumor therapy at NIR-II

biowindow, Biomaterials, 2019, 206, 101-114

19. Theranostic 2D ultrathin MnO2 nanosheets with fast responsibility to endogenous tumor microenvironment and exogenous

NIR irradiation, Biomaterials, 2018, 155, 54-63

20. Cooption of heat shock regulatory system for anhydrobiosis in the sleeping chironomid Polypedilum vanderplanki,

Proc. Natl. Acad. Sci., 2018, 115(10), E2477-E2486

21. Wnt Inhibitor Dickkopf-1 as a Target for Passive Cancer Immunotherapy,

Cancer Research, 2010, 70(13), 5326-36

22. Gadolinium polytungstate nanoclusters: a new theranostic with ultrasmall size and versatile properties for dual-modal MR/CT

imaging and photothermal therapy/radiotherapy of cancer, NPG Asia Material, 2016, 8, e273

23. 2D Superparamagnetic Tantalum Carbide Composite MXenes for Efficient Breast-Cancer Theranostics,

Theranostics, 2018, 8(6), 1648-1664

24. Connexin43 Hemichannels Contribute to Cadmium-Induced Oxidative Stress and Cell Injury,

Antioxidants & Redox Signaling, 2011, 14(12), 2427-39

25. Synthesis and characterization of hierarchically macroporous and mesoporous CaO-MO-SiO2-P2O5(M=Mg,Zn,Sr) bioactive

glass scaffolds, Acta Biomaterialia, 2011, 7(10), 3638-3644

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细胞增殖/毒性

发表于由

细胞增殖/毒性

细胞活力和细胞毒性检测可用于药物筛选和化学品的细胞毒性测试，检测方法可以基于各种细胞功能，例如酶活性、细胞膜通透性、细胞粘着、ATP产生、辅酶产生和核苷酸摄取活性。
细胞增殖/细胞毒性

CCK-8（WST®法，比色法）是通过使用还原性显色剂检测活细胞中的脱氢酶活性最终测定吸光度，是一种操作简便，安全性高，重复性好的测定细胞数的方法。可用于细胞增殖测试和细胞毒性测试。

Cell Counting Kit-Luminescence（CCK-L,化学发光法）试剂盒是一种通过Luciferase来确定细胞中的腺苷三磷酸（ATP）的细胞增殖-毒性检测试剂盒。通过化学发光（RLUs）检测细胞活性。作为新一代细胞活性检测的方法，与CCK-8相比，具有灵敏度高，反应速度快,10分钟后即可检测。并兼容96孔板与384孔板的多样品检测。

Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST（LDH检测，比色法）在测定细胞毒性时，除了CCK-8法这种以脱氢酶活性为细胞毒性指标的测定方法以外，还有以细胞膜损伤为指标的游离LDH活性的测定法。他们的不同点是，CCK-8或CCK-L法进行的毒性测试中，即使明显获得了细胞毒性，很难判断是细胞数量降低还是细胞活性下降。因此，判断细胞膜损伤作为另一指标，可利用游离LDH活性测定。

Calcein-AM/PI细胞双染试剂盒（活死双染，荧光法）是利用细胞活/死荧光染料，通过荧光成像的方式定性检测细胞死活的方法。与CFSE（活细胞染色，荧光法）相比，后者可用于流式细胞仪增殖检测，前者成像效果更好。

CCK-8检测OD值趋势不明显怎么办？

（电脑浏览点击此处）

快速（10 分钟）、微量（HeLa细胞15 cells以上）细胞增殖/毒性检测试剂盒-发光法(CCK-L)

（电脑浏览点击此处）

下表列出了每种细胞增殖和毒性测试方法的特征和比较。

产品名称 Cell Counting Kit-L Cell Counting Kit-8 Cytotoxicity LDH Assay   Kit-WST CFSE 活死细胞双染
用途 细胞增殖.毒性检测实验
悬浮细胞.原代细胞		 细胞增殖.毒性检测实验
天数实验		 细胞增殖.毒性检测实验
CAR-T.ADCC		 细胞增殖.毒性检测实验 细胞增殖.毒性检测实验
染料特点 检测方法 化学发光 吸光度 吸光度 荧光 荧光
染料 – WST-8 WST CFSE Calcein-AM&PI
显色后的
水溶性		 易溶 易溶 – 易溶 易溶
产品特点 检测原理 细胞内的ATP活性 细胞内的酶活性 死细胞释放的LDH活性 细胞传代数 细胞膜完整性
优势 ・可检测微量细胞数
（适用于原代细胞）		 ・细胞毒性低 ・死细胞数量直接检测
（适用于CAR-T、ADCC实验）		 ・流式检测方法准确 ・免疫荧光结果，与其他增殖毒性数据结合，数据更充实
・比吸光度法灵敏度更高
（适用于悬浮细胞）		 ・试剂稳定性高 ・可以与CCK-8双重验证 ・荧光时间长，可用于长时间检测细胞的增殖传代情况 ・文献数量多
・检测时间短（10min） ・试剂灵敏度高 ・高通量筛选
・高通量筛选 ・操作简便
・文献数量多
・高通量筛选
缺点 ・不适用细胞数量很多的实验 ・细胞数量少或部分悬浮细胞结果趋势不明显 ・药物和培养基不能含有氧化性/还原性物质 ・不能高通量筛选 ・不能高通量筛选
・需要使用多功能酶标仪 ・流式操作麻烦 ・无法定量检测，建议与其他方法结合使用
产品形态 溶液+粉末 溶液 溶液+粉末 粉末 粉末
产品货号 CK18 CK04 CK12/CK17 C375 C542

应当注意，由于用作检测的指标不同，试剂与方法不同，因此可获得的结果也不同。

《参考文献》

1) S. Watanabe, et al., Biochem. Biophys. Res. Com., 2016, 471, 191.

2) S. Jin, et al., Exp. Cell. Res., 2015, 339, 289.

3) L. Wu, et al., Am. J. Physiol. Gastroinest. Liver Physiol., 2015, 309, G695.

4) S. Wakatsuki, et al., J. Cell. Biol., 2015, 211, 881.

Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒货号：CK18 细胞活性（ATP检测）

发表于由
Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒货号：CK18
细胞活性（ATP检测）
ATP Assay Kit-Luminescence
商品信息
储存条件：0-5°C
运输条件：常温

特点：

● 操作简便，检测仅需10分钟

● 灵敏度高，微量细胞也可检测

● 悬浮细胞和原代细胞适合

选择规格：
200 tests
 现货
 
不可定量检测（无标准品）
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活动进行中
产品原理
实验注意事项
实验操作步骤

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产品原理

ATP是生物体内最直接的能量来源，在肌肉收缩、代谢反应、主动运输等方面被广泛使用，甚至被称作生物体内的能量货币。同仁化学研究所开发的Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒是一种通过Luciferase来确定细胞中的腺苷三磷酸（ATP）的细胞增殖-毒性检测试剂盒。

本试剂盒只需将各试剂混合后加入孔板，10 分钟后即可检测。不需要去除培养基、清洗细胞等复杂的操作。此外，本试剂盒还有诸如发光的半衰期在3 小时以上、数据的重现性高 、兼容96孔板 、384孔板的多样品检测等诸多优点。

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图1. Cell Counting Kit Luminescence 检测原理

实验注意事项

检测方法：多功能酶标仪

检测结果：化学发光值

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注意：该试剂盒只能比较实验组对照组结果，但是不能完全定量检测

（试剂盒内不含标准品）

实验操作步骤

1. 白色 96 孔板中，每孔加入 100 μl 细胞悬液（白色 384 孔板，每孔加入 25 μl 细胞悬液）。

*为了获得更准确的检测结果，建议每个实验组至少设置三个复孔（n=3）。

2. 各孔中加入 100 μl Working solution（白色 384 孔板，每孔加入 25 μl Working solution）。

*气泡会对实验结果产生影响，如果孔中有气泡请尽量清除。 使用电动移液器时，建议使用反向吸液模式(RevPIP Mode)。

*加入 Working solution 后，建议用酶标仪的振荡混匀功能震荡 2 min。由于光照会影响检测结果，如果必须在 有光源的地方震荡，建议用铝箔纸包覆孔板。

3. 将孔板静置于温度设定在 25℃的酶标仪内 10 min。

*如果酶标仪没有温度设定的功能，请将孔板至于 25℃培养箱或 25℃左右室温下，避光培养 10 min。

*为了保证发光信号的稳定性，建议此处的培养时间不要低于 10 min。

4. 检测发光值（RLU）。

CCK-L，仪器检测实验例，详见如下：（实验例仅供参考）

细胞内ATP活性检测（CCK-L）的仪器设置

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BAPTA-AM试剂货号：B018 CAS号：126150-97-8

发表于由
BAPTA-AM试剂货号：B018
O,O’-Bis(2-aminophenyl)ethyleneglycol-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, tetraacetoxymethyl ester
CAS号：126150-97-8
商品信息
储存条件：-20度保存
运输条件：室温
分子式：

C34H40N2O18

分子量：

764.68

特点：

 

● 螯合率高于EGTA

● 可螯合细胞内的钙离子

SDS下载
选择规格：
25mg
现货 
 
荧光探针检测方案
性质
参考文献
规格性状

性质

BAPTA-AM是BAPTA羧基的乙酰氧基甲基酯化产物，可以很容易地吸收到细胞中。 该酯被细胞内酯酶分解，显示出主体在细胞中作为BAPTA的功能。 生成的BAPTA保留在细胞内部。

参考文献

1) R. Y. Tsien, “New Calcium Indicators and Buffers with High Selectivity against Magnesium and Protons: Design, Synthesis, and Properties of Prototype Structures”, Biochemistry, 1980, 19 (11), 2396.
2) R. Y. Tsien, “A Non-disruptive Technique for Loading Calcium Buffers and Indicators into Cells”, Nature, 1981, 290, 527.
3) J. I. Korenbrot, D. L. Ochs, J. A. Williams, D. L. Miller and J. E. Brown, “The Use of Tetracarboxylate Fluorescent Indicators in the Measurement and Control of Intracellular Free Calcium Ions”, Soc. Gen. Physiol. Ser., 1986, 40, 347.
4) S. M. Harrison and D. M. Bers, “The Effect of Temperature and Ionic Strength on the Apparent Ca-affinity of EGTA and the Analogous Ca-chelators BAPTA and Dibromo-BAPTA”, Biochim. Biophys. Acta, 1987, 925, 133.
5) E. W. Gelfand and R. K. Cheung, “Dissociation of Unidirectional Influx of External Ca2+ and Release from Internal Stores in Activated Human T Lymphocytes”, Eur. J. Immunol., 1990, 20, 1237.
6) J. P. Kao, J. M. Alderton, R. Y. Tsien and R. A. Steinhardt, “Active Involvement of Ca2+ in Mitotic Progression of Swiss 3T3 Fibroblasts”, J. Cell Biol., 1990, 111, 183.
7) M. L. Schubert and J. Hightower, “Functionally Distinct Muscarinic Receptors on Gastric Somatostatin Cells”, Am. J. Physiol., 1990, 258, G982.
8) Y. Tojyo and Y. Matsumoto, “Inhibitory Effects of Loading with the Calcium-chelator 1, 2-Bis(o-aminophenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid (BAPTA) on Amylase Release and Cellular ATP Level in Rat Parotid Cells”, Biochem. Pharmacol., 1990, 39(11), 1775.

规格性状

规格性状：

该产品为无色液体。

纯度（HPLC）：98.0％以上

处理条件

1.危险物第4类，第3石油类，危险等级Ⅲ 2.无火 3.储存方法：冷冻，避光

BCECF试剂货号：B031 CAS号：85138-49-4

发表于由
BCECF试剂货号：B031
2′,7′-Bis(carboxyethyl)-4 or 5-carboxyfluorescein
CAS号：85138-49-4
商品信息
储存条件：室温
运输条件：室温
SDS 
选择规格：下载
5mg
期货 
 
荧光探针检测方案
性质
注意事项
溶解例
参考文献
规格性状

性质

　　5-羧基荧光素是一种通过将染料掺入细胞来研究细胞内pH变化的方法，但是当用于pKa = 7.0的细胞(如淋巴细胞)中时，染料会从细胞中洗脱出来，很难快速测定。 BCECF引入了两个羧乙基基团以减少从细胞中的洗脱。 适用于研究细胞内pH变化(λex= 490 nm，λem= 526 nm)。

注意事项

　　・如果将本产品以粉末形式取出并使用，由于其性质，静电等因素，它可能会粘附在容器内部，从而难以完全取出。

・对于粘附在容器上且无法取出的粉末，请在使用前将要使用的溶剂倒入容器中并溶解。

溶解例

2 mg / ml(甲醇)

参考文献

1) R. A. Steinhardt and D. Mazia, “Development of K+-conductance and Membrane Potentials in Unfertilized Sea Urchin Eggs After Exposure to NH4OH”, Nature, 1973, 241, 400.
2) T. J. Rink, R. Y. Tsien and T. Pozzan, “Cytoplasmic pH and Free Mg2+ in Lymphocytes”, J. Cell Biol., 1982, 95, 189.
3) A. M. Paradiso, R. Y. Tsien and T. E. Machen, “Na+ -H+ Exchange in Gastric Glands as Measured with a Cytoplasmic-trapped, Fluorescent pH Indicator”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1984, 81, 7436.
4) S. Grinstein, B. Elder and W. Furuya, “Phorbol Ester-induces Changes of Cytoplasmic pH in Neutrophils: Role of Exocytosis in Na+ – H+ Exchange”, Am. J. Physiol., 1985, 248, C379.
5) G. B. Zavoico, E. J. Cragoe and M. B. Feinstein, “Regulation of Intracellular pH in Human Platelets”, J. Biol. Chem., 1986, 261(28), 13160.
6) G. R. Bright, W. Fisher, J. Rogowska and L. Taylor, “Fluorescence Ratio Imaging Microscopy: Temporal and Spatial Measurements of Cytoplasmic pH”, J. Cell Biol., 1987, 104, 1019.
7) C. Aalkjaer and E. J. Gragoe Jr, “Intracellular pH Regulation in Resting and Contracting Segments of Rat Mesenteric Resistance Vessels”, J. Physiol., 1988, 402, 391.
8) K. Tsujimoto, M. Semadeni, M. Huflejt and L. Packer, “Intracellular pH of Halobacteria Can Be Determined by the Fluorescent Dye 2′,7′-bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein”, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988, 155, 123.
9) M. A. Kolber, R. R. Quinones, R. E. Gress and P. A. Henkart, “Measurament of Cytotoxicity by Target Cell Release and Retention of the Fluorescent Dye Bis-carboxyethyl-carboxyfluorescein(BCECF)”, J. Immunol. Methods, 1988, 108, 255.
10) H. Harada, Y. Kanai, M. Anzai and Y. Suketa, “cAMP Activates Cl–/HCO3– Exchange for Regulation of Intracellular pH in Renal Epithelial Cells”, Biochim. Biophys. Acta, 1991, 1092, 404.
11) C. C. Freudenrich, E. Murphy, L. A. Levy, R. E. London and M. Lieberman, “Intracellular pH Modulates Cytosolic Free Magnesium in Cultured Chicken Heart Cells”, Am. J. Physiol., 1992, 262(4), C1024.
12) K. Khodakhah and D. Ogden, “Functional Heterogeneity of Calcium Release by Inositol Triphosphate in Single Purkinje Neurones, Cultured Cerebellar Astorocytes, and Peripheral Tissues”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 90, 4976.
13) G. Boyarsky, C. Hanssen and L. A. Clyne, “Superiority of in vitro Over in vivo Calibrations of BCECF in Vascular Smooth Muscle Cells”, FASEB J., 1996, 10, 1205.
14) S. A. Weston and C. R. Parish, “New Fluorescent Dyes for Lymphocyte Migration Studies Analysis by Flow Cytometry and Fluorescent Microscopy”, J. Immunol. Methods, 1990, 133, 87.
15) L. S. D. Clerck, C. H. Bridts, A. M. Mertens, M. M. Moens and W. J. Stevens, “Use of Fluorescent Dyes in the Determination of Adherence of Human Leucocytes to Endothelial Cells and the Effects of Fluorochromes on Cellular Function”, J. Immunol. Methods, 1994, 172, 115.

规格性状

规格性状：

该产品为橙色至红棕色粉末，可溶于甲醇。

纯度（HPLC）：85.0％以上

溶于甲醇：测试合格

荧光光谱：测试合格

红外光谱：测试合格

NMR光谱：测试一致

处理条件：

1.储存方法：避光

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