Cellstain- MitoRed试剂货号:R237

Cellstain- MitoRed试剂货号:R237
9-[2-(4′-MethylcoumariN-7′-oxycarbonyl)phenyl]-3,6-bis(diethylamino)xanthylium chloride
Cellstain- MitoRed
商品信息
储存条件:0-5度保存,避光防潮
运输条件:室温
分子式:

C38H37ClN2O5

分子量:

637.17

特点:

 

● 基于膜电位对线粒体染色

● 红色荧光

● 激发和发射波长分别为560 nm和580 nm

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选择规格:
50μg*8
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线粒体检测方案
规格性状
产品概述
荧光特性
操作说明
文献
常见问题Q&A

规格性状

规格

特性:该产物为品红色至紫棕色固体,可溶于二甲基亚砜和甲醇。

可溶于二甲基亚砜:试验成功

NMR光谱:试验适合

产品概述

MitoRed为基于罗丹明的可透过细胞膜的染料。它集中于线粒体内并发出红色荧光。MitoRed与线粒体的相互作用取决于线粒体的膜电位。

可用20-200 nM MitoRed对线粒体染色。MitoRed的激发和发射波长分别为560 nm和580 nm。

MitoRed.jpg

荧光特性

λex=560 nm, λem=580 nm

操作说明

染色步骤

1. 将50 µg MitoRed溶解到78 µl DMSO中制备成1 mM MitoRed-DMSO溶液。

2. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104-5×105个/ml。

3. 孵育该载玻片,用PBS或Hank’s液洗涤细胞。

4. 用培养基稀释1 mM MitoRed溶液以制备20-200 nM MitoRed缓冲液。

5. 将MitoRed缓冲液a) 加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。

6. 去除MitoRed缓冲液并用培养基洗涤细胞。b)

7. 用带有罗丹明滤光片的荧光显微镜观察细胞。

a) 加入细胞前将MitoRed缓冲液放在37℃下孵育。

b) 洗涤细胞后为了固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15-20分钟,接着用PBS洗涤。

1606881211185975.png

文献

1) R. Ikeda, T. Sugita, E. S.  Jacobson and T. Shinoda, “Effects of Melanin upon Susceptibility of  Cryptococcus to Antifungals”, Microbiol.  Immunol., 2003, 47(4),  271.

常见问题Q&A

Q1:如何使用Mito Red。

 

 

 

 

 

 

A1:

下面显示了一个使用HeLa细胞的示例。

*根据细胞类型和观察条件,有必要检查试剂浓度和染色条件。

<试剂>

-Cellstain®-MitoRed

二甲基亚砜

用DMSO 78μL→1 mmol / L溶液溶解MitoRed 50μg(1瓶)

<操作方法>

1.培养小室玻片上的细胞,以使细胞密度合适。

(1×105至1×106细胞/ mL)

2.除去培养基,并轻轻洗涤(培养基,PBS,Hank溶液等)。

用中等浓度将3.1 mmol / L的MitoRed溶液稀释至最终浓度为20-200 nmol / L。

(最好先将其在37°C的温度下保温,然后再添加到细胞中)

将稀释的MitoRed溶液加入孔中,并在培养条件下孵育大约30分钟至1小时。

4.除去MitoRed溶液,并用中性溶液洗涤。

5.在荧光显微镜G激发下观察。

(Λex= 560 nm,λem= 580 nm)

固定电池时,请执行以下(3)之后的操作。

4.除去MitoRed溶液并洗涤。

(无血清培养基,PBS,Hank溶液等)

5.用5.10%中性福尔马林缓冲液固定15至20分钟。

6.用PBS清洁。

7.在荧光显微镜下观察。

 

 

Q2:细胞染料的激发波长和发射波长是多少。

A2:

excel11.png

 

Q3:不管是活细胞还是死细胞,它都会染色细胞内线粒体吗?

 

 

 

 

 

 

 

A3:仅活细胞。它不能用于死细胞,因为线粒体的膜电位会丢失。

 

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