Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒货号:CK18 细胞活性(ATP检测)

Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒货号:CK18 细胞活性(ATP检测)
ATP Assay Kit-Luminescence
商品信息
储存条件:0-5°C
运输条件:常温

特点:

 

● 操作简便,检测仅需10分钟

● 灵敏度高,微量细胞也可检测

● 悬浮细胞和原代细胞适合

选择规格:
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产品原理

ATP是生物体内最直接的能量来源,在肌肉收缩、代谢反应、主动运输等方面被广泛使用,甚至被称作生物体内的能量货币。同仁化学研究所开发的Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒是一种通过Luciferase来确定细胞中的腺苷三磷酸(ATP)的细胞增殖-毒性检测试剂盒。

本试剂盒只需将各试剂混合后加入孔板,10 分钟后即可检测。不需要去除培养基、清洗细胞等复杂的操作。此外,本试剂盒还有诸如发光的半衰期在3 小时以上、数据的重现性高 、兼容96孔板 、384孔板的多样品检测等诸多优点。

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图1. Cell Counting Kit Luminescence 检测原理

实验注意事项

检测方法:多功能酶标仪

检测结果:化学发光值

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注意:该试剂盒只能比较实验组对照组结果,但是不能完全定量检测

(试剂盒内不含标准品)

实验操作步骤

1. 白色 96 孔板中,每孔加入 100 μl 细胞悬液(白色 384 孔板,每孔加入 25 μl 细胞悬液)。

*为了获得更准确的检测结果,建议每个实验组至少设置三个复孔(n=3)。

2. 各孔中加入 100 μl Working solution(白色 384 孔板,每孔加入 25 μl Working solution)。

*气泡会对实验结果产生影响,如果孔中有气泡请尽量清除。 使用电动移液器时,建议使用反向吸液模式(RevPIP Mode)。

*加入 Working solution 后,建议用酶标仪的振荡混匀功能震荡 2 min。由于光照会影响检测结果,如果必须在 有光源的地方震荡,建议用铝箔纸包覆孔板。

3. 将孔板静置于温度设定在 25℃的酶标仪内 10 min。

*如果酶标仪没有温度设定的功能,请将孔板至于 25℃培养箱或 25℃左右室温下,避光培养 10 min。

*为了保证发光信号的稳定性,建议此处的培养时间不要低于 10 min。

4. 检测发光值(RLU)。

CCK-L,仪器检测实验例,详见如下:(实验例仅供参考)

细胞内ATP活性检测(CCK-L)的仪器设置

参考文献

编号 文献 IF
1 Impact   of the combined timing of PD-1/PD-L1 inhibitors and chemotherapy
on the outcomes in patients with refractory lung cancer, ESMO Open,2021,   6(2):100094
2021 6.5
2 SIRT3-Mediated   SOD2 and PGC-1α Contribute to Chemoresistance in Colorectal Cancer Cells   ,Annals of Surgical Oncology,2021, 28(8):4720-4732 2021 5.3
3 An Fc-muted bispecific antibody targeting PD-L1 and 4-1BB induces antitumor immune activity in colorectal cancer without systemic toxicity,Cellular & Molecular Biology Letters, 2023,doi.org/10.1186/s11658-023-00461-w 2023 8.3