Cell Cycle Assay Solution Deep Red试剂货号:C548

Cell Cycle Assay Solution Deep Red试剂货号:C548
细胞周期检测试剂盒-深红色
Cell Cycle Assay Solution Deep Red
商品信息
储存条件:0-5 ℃
运输条件:常温

特点:

·检测时间短

·固定和不固定都可以

·悬浮细胞和贴壁细胞都可以

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细胞周期
产品概述
产品特性
实验案例
常见问题Q&A
参考文献

产品概述

  细胞周期的调控系统与细胞增殖密切相关。一个细胞产生两个子细胞的细胞分裂是细胞周期的一部分。细胞周期可以通过流式细胞术测量细胞DNA染色,然后分析染色细胞核在细胞周期阶段的比例来分析。细胞周期分为两个主要阶段:间期和有丝分裂(M)期。间期由G1期(发生在细胞分裂之前的DNA合成准备)、S期(DNA合成和复制)和G2期(具有重复染色体的单个细胞)组成。M期包括有丝分裂和胞质分裂。细胞周期的进展受细胞周期蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶的调控。分析细胞周期检查点的作用机制,对确定抗癌药物及其他药物的作用具有重要意义

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产品特性

产品特点:检测时间短

碘化丙啶(PI)通常用于使用流式细胞仪进行细胞周期分析。与这种分析方法相比,深红色细胞周期测定溶液具有良好的膜渗透性,并使用对DNA具有高特异性的染料,因此仅需将试剂添加到细胞悬液中就可以分析细胞周期。此外,深红色细胞周期测定解决方案中还提供了633 nm激光器,使您可以同时使用高度通用的488 nm激光器。

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实验案例

对比实验:准确的判段活细胞的细胞周期

用细胞周期流式检测试剂(蓝色和深红色)染色的活CHO细胞,同时使用广泛应用的PI染色产品和同仁已有的细胞周期检测试剂盒,进行了类似的实验。结果,通过细胞周期流式检测试剂获得的结果与PI染色结果相同(如下所示)。与四种不同的产品相比,我们的产品在活细胞中获得了清晰的直方图峰。

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示例:抗癌剂引起的细胞功能的变化

阿霉素(DOX)在细胞周期的G2 / M期抑制细胞增殖,并诱导细胞衰老。将DOX加入A549细胞后,G2 / M期的峰值增高(Cell Cycle Assay Solution Deep Red、Blue;C548\C549),诱导细胞衰老(Cellular Senescence Detection Kit – SPiDER-βGal;SG03)和线粒体膜电位发生变化(JC-1 MitoMP Detection Kit;MT09)

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常见问题Q&A

Q1:悬浮细胞和贴壁细胞都可以检测吗?
A1:悬浮细胞和贴壁细胞都可以使用。
Q2:胰酶会影响检测吗?
A2:如果实验中有胰酶残留,会影响检测;

如果回收细胞时使用胰酶,请确保按照方案进行清洁操作,去除残留胰酶。

Q3:需要固定细胞吗?
A3:固定和不固定细胞都可以。
Q4:如果需要对要检测的固定细胞进行保存,是应该染色前保存还是染色后保存?
A4:都可以,本公司实际对比案例:

分别在保存固定细胞前后做了染色实验,检测结果没有差异

・将固定细胞冷藏(4℃)后保存1周,根据使用说明书对细胞进行染色。

・根据使用说明书对固定细胞进行染色,将细胞冷藏(4℃)后保存1周。

*冷冻保存细胞的话有可能会沉淀不溶物,所以不推荐冷冻保存。

Q5:用Cell Cycle Assiay  Soluton染色后,为了除去过量的试剂可以清洗细胞吗?
A5:不推荐染色后清洗细胞。

由于洗涤时的离心操作,有可能影响细胞周期解析的实验结果。

Q6:做流式检测时,应该注意哪些方面呢?
A6:流式检测时,需要在合适的条件下进行测检测。

以下列举了一些失败的案例。

1、检测通道选择不合适

例如一般的细胞周期检测都会使用PI(PE)通道,但是我们试剂盒选择PI通道并不能得到最适结果,请参照一下波段选择最适通道:

2、检测时电压过高(或过低)。

当流式检测时电压过高(或过低)时,都无法得到最适结果。

请通过直方图将G0/G1期、S期、G2/M期调整为清晰的测量电压。

3、细胞数量选择不合适

例如流式检测是圈门选择不恰当,会导致结果不好。

分析时请对选择所有细胞。

参考文献

1)細胞(HCAECs)

N. Sasaki, Y. Itakura and M. Toyoda, “Rapamycin promotes endothelial-mesenchymal transition during stress-induced premature senescence through the activation of autophagy”, Cell Commun. Signal, 2020, 18(1), 43

2)細胞(ARPE-19)

T. Yamazaki, H. Suzuki, S. Yamada, K. Ohshio, M. Sugamata, T. Yamada and Y. Morita, “Lactobacillus paracasei KW3110 Suppresses Inflammatory Stress-Induced Premature Cellular Senescence of Human Retinal Pigment Epithelium Cells and Reduces Ocular Disorders in Healthy Humans”, Int J Mol Sci, 2020, 21(14), 5091

2)細胞(MIA PaCa-2)

N. Sasaki, F. Gomi, F. Hasegawa, K. Hirano, M. Fujiwara, M. Toyoda and T. Ishiwata, “Characterization of the metastatic potential of the floating cell component of MIA PaCa-2, a human pancreatic cancer cell line”, Biochem. biophys. res. commun, 2020, 522(4), 881-888

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